传递窗验证方案.报告

方案起草人: 方案审核人: 方案批准人:

传递窗验证方案

年 年 年 月 日月 日月 日

目 录

1. 综 述 2. 验证的目的 3. 职责与成员 3.1验证委员会职责 3.2质量保证部职责 3.3成员

3.4验证实施的时间进度 4. 验证内容 4.1安装确认 4.1.1仪器基本信息 4.1.2设备档案 4.1.3安装条件确认 4.1.4安装确认 4.2运行确认 4.2.1互锁确认 4.2.3辐照强度测定 4.2.4紫外强度分布 4.3 性能确认 4.4偏差处理

5. 拟订日常监测程序及再验证周期 6. 验证结果评定与结论 7. 附件

1. 综 述：

传递窗是一种洁净室的辅助设备，主要用于洁净区与洁净区之间，洁净区与非洁净区之间小件物品的传递，以减少洁净室的开门次数，使洁净室的污染降低到最低程度。 传递窗内安装有紫外灯，物品经紫外线照射消毒后进入洁净区。紫外线是一种电磁辐射， 波长190～350nm ，其中以253.7nm 的杀菌力最强，可使DNA 链上相邻嘧啶碱基之间形成二聚体，抑制DNA 的复制，导致突变或死亡。紫外线的杀菌力与紫外线强度、照射时间、温度和湿度等因素有关。

2. 验证的目的：

通过验证确认层流洁净工作台是否能够达到设备性能指标，符合检验产品需求。 3. 职责与成员 3.1验证委员会职责 3.1.1负责验证方案的审批

3.1.2负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施 3.1.3负责验证数据及结果的审核 3.1.4负责验证报告的审批 3.1.5负责发放验证证书 3.1.6负责再验证周期的确认 3.2质量保证部职责

3.2.1 负责验证用样品及其它消耗性备品的准备 。 3.2.2 负责备品、备件的保存。 3.2.3 负责设备仪器的操作。 3.2.4 负责记录各种测试结果。 3.2.5 负责拟订再验证项目及周期。

3.2.6 负责收集各项验证、试验记录，起草验证报告，报验证委员会。 3.3成员

4. 验证内容 4.1安装确认

4.1.1确认设备的安装是否符合原设计的条件。

4.2运行确认：

4.2.1互锁确认：两侧门设有互锁装置，确保两侧门不能同时处于开启状态。

4.2.2辐照强度测定：开启紫外灯5min 后，用中心波长为253.7nm 的紫外线强度测定仪在灯管下方垂直中心操作面处测量其辐照度值（uW/cm2）。普通型或低臭氧型直管紫外灯，新灯管的辐照度值应为：功率10W ，≥65uW/cm2 ；功率15W ，≥145 uW/cm2 。使用中的灯管其辐照度值：功率10W ，≥45uW/cm2 ；功率15W ，≥100 uW/cm2 ，低于此值者应予以更换。

4.2.3紫外强度分布：开启紫外灯5min 后，在传递窗底部测量中央及四角5个位置的紫外线强度（uW/cm2），确定紫外线强度最弱位置。以紫外线强度最弱位置达到所需照射剂量的时间作为消毒合格时间。（附件1）

4.3性能确认

确认紫外灯对细菌和真菌的杀灭效果。性能确认在运行确认之后进行，若运行确认出现偏差，须在偏差解决之后进行。

4.3.1培养基的制备 4.3.1.1营养琼脂培养基

配方：营养琼脂培养基粉 31.0g 纯化水 1000ml 配制：称取营养琼脂培养基粉置适宜容器中，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH 至7.1±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121℃×15分钟。

4.3.1.2改良马丁琼脂培养基

配方：改良马丁琼脂培养基粉 42.0g 纯化水 1000ml 配制：称取改良马丁琼脂培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH 至6.4±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115℃×20分钟。

4.3.1.3营养肉汤培养基

配方：营养肉汤培养基 20g 纯化水 1000ml

配制：称取营养肉汤培养基20克，加1000ml 纯化水，加热溶解，加热至沸，冷却至常温，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121℃×15分钟。

4.3.1.4改良马丁培养基

配方：改良马丁培养基粉 28.0g 纯化水 1000ml 配制：称取改良马丁培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH 至6.4±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115℃×20分钟。

4.3.2菌悬液的制备

4.3.2.1接种金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中,30～35℃培养18～24小时；

4.3.2.2接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中,23～28℃培养18～24小时。

4.3.3稀释液

1％蛋白胨—PBS 溶液：取磷酸二氢钾1.36g 、磷酸氢二钠2.83g 、蛋白胨10.0g ，加水1000ml ，微温溶解，分装，置高压灭菌器121℃×30分钟灭菌。

4.3.4菌片的制备

4.3.4.1试验中使用的菌片是以菌液滴加于载体上制成（1.0cm ×1.0cm 的不锈钢片）。所用载体染菌前应进行脱脂处理。脱脂方法如下：①将载体放在含肥皂的水中煮沸30min ；②纯化水洗净；③纯化水煮沸10min ；④用纯化水漂洗至pH 呈中性；⑤晾干备用。

4.3.4.2载体经灭菌后使用滴染法染菌。将灭菌载体平放于灭菌平皿内，每个载体滴注10ul 菌悬液，用10ul 移液器接灭菌塑料吸头，滴染菌液，并用接种环涂匀整个载体表面。滴染菌液后，染菌载体可置超净台上晾干后使用。

4.3.4.3每个菌片的染菌量即回收菌量应为1×105～5×106cfu/片。 4.3.5载体定量消毒试验

4.3.5.1取3种菌染菌载片各4个。开启紫外灯5min 后，将12个染菌载片平放于无菌平皿内，水平放于紫外线强度最弱的位置处照射，于4个不同间隔时间（15min 、30 min、45 min、60min ）各取出1个染菌玻片，分别投入4个盛有10ml 稀释液的试管中，用超声清洗器清洗20s ，洗脱载片上的菌体。

4.3.5.2取洗脱液或其稀释液1ml ，作平板倾注。细菌放30～35℃培养48小时做活菌计数，真菌放23～28℃培养72小时做活菌计数。（附件2）

4.3.5.3阳性对照，除不做照射处理外，操作同上。

4.3.6杀灭率计算

微生物杀灭率=（X0-Xt ）/X0*100% 照射前微生物数量为X0, 照射后微生物数量为Xt. 4.3.7消毒合格时间

在照射强度最弱处，对细菌及其真菌的杀灭率应≥99.99%所需的时间即为消毒合格时间。其它传递窗，确定最弱照射强度后，根据所需照射剂量确定消毒合格时间。

照射剂量（uW ·s/cm2 ）＝紫外线照射强度（uW/cm2）×时间（s ） 4.4偏差处理

4.4.1运行确认在安装确认之后进行，若安装确认出现偏差，须在解决偏差之后进行。若无任何偏差时，每6个月对该系统进行紫外灯强度确认。

5. 拟订日常监测程序及再验证周期

质保部负责传递窗的确认、运行情况，拟订再验证周期（附件5），报验证委员会审核。

6. 验证结果评定与结论

质保部负责收集各项验证、试验结果记录，报验证委员会。

验证委员会负责对验证结果进行综合评审，做出验证结论，发放验证证书（附件6），确认传递窗的再验证周期。对验证结果的评审包括：

6.1验证试验是否有遗漏？

6.2 验证实施过程中对验证方案有无修改？修改原因、依据以及是否经过批准？ 6.3验证记录是否完整？

6.4 验证试验结果是否符合标准要求？偏差及对偏差的说明是否合理？是否需要进一步补充试验？

7. 附件

附件1：紫外强度分布

确认人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日

附件2： 载体定量消毒试验

确认人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日

传递窗验证报告

报告起草人: 年 月 日 报告审核人: 年 月 日 报告批准人: 年 月 日

目 录

1. 概 述 2. 验证内容 2.1安装确认 2.1.1仪器基本信息 4.1.2设备档案 4.1.3安装条件确认 4.1.4安装确认 4.2运行确认 4.2.1互锁确认 4.2.3辐照强度测定 4.2.4紫外强度分布 4.3 性能确认

3. 拟订日常监测程序及再验证周期 4. 验证结果评定与结论：

1. 综 述：

本验证按规定的程序进行，并按已批准的方案实施验证。旨在证实传递窗能够满足药品检验及GMP 的要求。

2. 验证内容 2.1安装确认

2.1.1确认设备的安装是否符合原设计的条件。

确认人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日

2.2运行确认：

2.2.1互锁确认：两侧门设有互锁装置，确保两侧门不能同时处于开启状态。 确认结果：

确认人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日 2.2.2辐照强度测定：开启紫外灯5min 后，用中心波长为253.7nm 的紫外线强度测定仪在灯管下方垂直中心操作面处测量其辐照度值（uW/cm2）。普通型或低臭氧型直管紫外灯，新灯管的辐照度值应为：功率10W ，≥65uW/cm2 ；功率15W ，≥145 uW/cm2 。使用中的灯管其辐照度值：功率10W ，≥45uW/cm2 ；功率15W ，≥100 uW/cm2 ，低于此值

者应予以更换。

确认结果： 确认人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日 2.2.3紫外强度分布：开启紫外灯5min 后，在传递窗底部测量中央及四角5个位置的紫外线强度（uW/cm2），确定紫外线强度最弱位置。以紫外线强度最弱位置达到所需照射剂量的时间作为消毒合格时间。

紫外强度分布测试表

确认人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日 2.3性能确认

确认紫外灯对细菌和真菌的杀灭效果。性能确认在运行确认之后进行，若运行确认出现偏差，须在偏差解决之后进行。

2.3.1培养基的制备 2.3.1.1营养琼脂培养基

配方：营养琼脂培养基粉 31.0g 纯化水 1000ml 配制：称取营养琼脂培养基粉置适宜容器中，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH 至7.1±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121℃×15分钟。

2.3.1.2改良马丁琼脂培养基

配方：改良马丁琼脂培养基粉 42.0g 纯化水 1000ml 配制：称取改良马丁琼脂培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH 至6.4±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115℃×20分钟。

2.3.1.3营养肉汤培养基

配方：营养肉汤培养基 20g 纯化水 1000ml 配制：称取营养肉汤培养基20克，加1000ml 纯化水，加热溶解，加热至沸，冷却至常温，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121℃×15分钟。

2.3.1.4改良马丁培养基

配方：改良马丁培养基粉 28.0g 纯化水 1000ml 配制：称取改良马丁培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH 至6.4±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115℃×20分钟。

2.3.2菌悬液的制备

2.3.2.1接种金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中,30～35℃培养18～24小时；

2.3.2.2接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中,23～28℃培养18～24小时。

2.3.3稀释液

1％蛋白胨—PBS 溶液：取磷酸二氢钾1.36g 、磷酸氢二钠2.83g 、蛋白胨10.0g ，加水1000ml ，微温溶解，分装，置高压灭菌器121℃×30分钟灭菌。

2.3.4菌片的制备

2.3.4.1试验中使用的菌片是以菌液滴加于载体上制成（1.0cm ×1.0cm 的不锈钢片）。所用载体染菌前应进行脱脂处理。脱脂方法如下：①将载体放在含肥皂的水中煮沸30min ；②纯化水洗净；③纯化水煮沸10min ；④用纯化水漂洗至pH 呈中性；⑤晾干备用。

2.3.4.2载体经灭菌后使用滴染法染菌。将灭菌载体平放于灭菌平皿内，每个载体滴注10ul 菌悬液，用10ul 移液器接灭菌塑料吸头，滴染菌液，并用接种环涂匀整个载体表面。滴染菌液后，染菌载体可置超净台上晾干后使用。

2.3.4.3每个菌片的染菌量即回收菌量应为1×105～5×106cfu/片。

2.3.5载体定量消毒试验

2.3.5.1取3种菌染菌载片各4个。开启紫外灯5min 后，将12个染菌载片平放于无菌平皿内，水平放于紫外线强度最弱的位置处照射，于4个不同间隔时间（15min 、30 min、45 min、60min ）各取出1个染菌玻片，分别投入4个盛有10ml 稀释液的试管中，用超声清洗器清洗20s ，洗脱载片上的菌体。

2.3.5.2取洗脱液或其稀释液1ml ，作平板倾注。细菌放30～35℃培养48小时做活菌计数，真菌放23～28℃培养72小时做活菌计数。

2.3.5.3阳性对照，除不做照射处理外，操作同上。 阳性对照结果：

确认人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日

4.3.6杀灭率计算

微生物杀灭率=（X0-Xt ）/X0*100% 照射前微生物数量为X0, 照射后微生物数量为Xt. 2.3.7消毒合格时间

在照射强度最弱处，对细菌及其真菌的杀灭率应≥99.99%所需的时间即为消毒合格时间。其它传递窗，确定最弱照射强度后，根据所需照射剂量确定消毒合格时间。

照射剂量（uW ·s/cm2 ）＝紫外线照射强度（uW/cm2）×时间（s ） 载体定量消毒试验结果：

确认人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日

3. 拟订日常监测程序及再验证周期（附件1） 4. 验证结果评定与结论：

通过验证证明，本仪器性能确认符合要求，本仪器能满足检验需要，仪器性能与设计要求吻合。故认定本仪器验证合格

附件1：

再验证项目及周期