细菌鉴定及检测方法
细菌鉴定及检测方法
一、 启动条件
1、目的样出现坏包，若批次相同，取表现性状相同的任意一包进行细菌初步鉴定。若批次不同则分别进行细菌初步鉴定。
2、随机样出现坏包，必须进行细菌初步鉴定。
二、 胀包
1、记录批次。
2、及时用72%的酒精对样品的外表进行消毒，尽量不损坏封合待以后检查。在超净台内以无菌操作剪开包装，再避开横竖封处剪开一个圆形或三角形。
3、对样品进行微生物划线培养。
3.1采用普通营养琼脂培养基做细菌的划线培养36±1℃、48小时。
3.2分别吸取10毫升样品到两个无菌的小试管中，，分别在80和100℃的水
浴中加热10分钟，冷却用营养琼脂分别做芽孢（36±1℃、72小时）和耐热芽孢（55±1℃、72小时）的划线培养。
3.3采用普通营养琼脂培养基或快速检测培养基做嗜冷菌/低温菌的划线培
养（4—6℃ 10天或21±0.5℃ 25小时）。
3.4 必须用高盐察氏或虎红琼脂培养基做霉菌和酵母菌的划线培养
（25—28℃ 5--7天）
4、对样品做感官检测。
5、用PH计检测样品的PH值。
6、将样品倒掉，进行包装密封性检查，并进行记录。
7、记录菌落特征。
8、选区不同形态的单一菌落进行坚定。
8.1 革兰氏阴性菌和阳性菌的鉴定：
8.1.1涂片、革兰氏染色、镜检。或结晶紫染色、镜检、氢氧化钾拉
丝试验。
8.1.2革兰氏染色、结晶紫染色方法见《微生物检测》
8.1.3氢氧化钾拉丝试验
在微生物载物片上滴一滴3%氢氧化钾，用接种针从培养皿上的
菌落中挑取微生物，放在氢氧化钾溶液中用力搅拌。7—10秒后，抬起针头，观察针头和玻片之间是否有丝状物，如果15—20 秒后二者之间无丝状物，停止搅拌。
判定：无丝状物 阳性； 有丝状物 阴性。
8.2 过氧化氢酶试验（或过氧化氢酶试纸）（产气试验）：
试剂：10%过氧化氢溶液
步骤： 在微生物载物片上滴一滴10%过氧化氢，用接种针从培养皿上的
菌落中挑取微生物，放在过氧化氢溶液中看是否有气体产生。
判定：产气 阳性； 不产气 阴性。
8.3氧化酶试验
试剂：含1%四甲基双噻二胺和99%的乙醇溶液。
步骤：用上述试剂将一张滤纸浸透（或直接采用氧化酶试纸条），然后进
行细菌培养物的涂片试验。
判定：30秒内使显色物质变为深蓝色 阳性， 不变色 阴性。
三、 酸包
1、发现酸包后，及时将料液快速转入无菌瓶中。
2、记录批次
3、其它项目检测同胀包。