实验三 紫外分析方法的建立
实验三 紫外分析方法的建立
实验目的:
1、掌握紫外分析方法验证的内容及要求
2、掌握建立分析方法的一般程序
3、进行扑热息痛片的含量测定
实验内容:
一、线性关系的测定
精密称取扑热息痛对照品约40mg 于250ml 容量瓶中,加0.5%NaOH50ml溶解后,加水稀释至刻度,摇匀,作为标准贮备液。分别精密量取2,4,6,8,10,12ml 标准贮备液于6个100ml 容量瓶中,加0.4%NaOH15ml后用水稀释至刻度,摇匀。于257nm 测定吸收度。计算在此范围内吸收度与浓度的线性关系方程A=a+bC(r= ,n=6), 线性范围0.32~
1.92mg/ml.
二、回收率试验
取扑热息痛片10片,精密称定并研细,精密称取6等份细粉(相当于扑热息痛40mg )于250ml 量瓶中,按1:1分别精密称取并加入扑热息痛对照品,按样品测定项下操作测定吸收度。按标准曲线或对照品吸收度计算百分回收率。
三、精密度试验
按样品测定项下操作测定的同批样品,计算6份测定结果的变异系数(RSD ).
四、样品测定
取扑热息痛片10片,精密称定后研细,精密称取细粉(相当于扑热息痛40mg )于250ml 量瓶中,加0.4%NaOH50ml及50ml 水,振摇15min 后用水稀释至刻度,摇匀, 过滤。弃去初滤液,精密量取续滤液5ml 于100ml 量瓶中,加0.4%NaOH10ml并用水稀释至刻度,摇匀,在257nm 测定吸收度。按C 8H 9NO 2百分吸收系数为715计算百分含量。
五、溶液稳定性试验
待测样品溶液室温放置,于1,2,4,6小时测定结果与0小时比较。
注意事项:
1. 空白溶液与供试品溶液必须澄清,不得有浑浊。如有浑浊,应预先过滤,并弃去初滤液。
2.测定时,除另有规定外,应以配制供试品溶液的同瓶溶剂为空白对照,采用1cm 的石英吸收池。
3.在规定的吸收峰波长±2nm以内测试几个点的吸收度,以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确,除另有规定外,吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内;否则应考虑该试样的真伪、纯度以及仪器波长的准确度,并以吸收度最大的波长作为测定波长。
4.一般供试品溶液的吸收度读数,以在0.3~0.7之间的误差较小。
5.吸收池应选择配对,否则要引入测定误差。在规定波长下两个吸收池的透光率相差小于0.5%的吸收池作配对,在必要的情况时,须在最终测量扣除吸收池间的误差修正值。
6.由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收,因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数,再计算含量。
思考题:
1、简述紫外分析方法验证的内容及要求,试验注意事项。
2、简述建立分析方法的一般程序。