2015药典纯化水微生物测定方法-3
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1105非无 菌产 品微 生物 限度 查 检微 :生计物 数法
(3) 油 类 供试脂品
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Ⅱ中
卧典药 ⒛51年 版或
薄膜过 滤 处 理 后 再加 人 试 验菌悬 液 进 方 法行 适 性 用 验 。试
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取供 试品 ,加 人无 菌 十 四 烷酸 异 丙
酯 使 解溶,或 与 最少 量 并 能使 供 试 乳 化品 的 无 聚菌山 梨酯
3.抗
活 性 菌的 除去或 灭 活
供 液 接 种 后 ,按试 下列 “” 微生 物 回收规 定方的 进 法 行 微生 物 计 。数 试若 验组 菌 落 数 减 供 去 试品 照 对组 菌 落 的值数小 菌于对液照 组菌 数落 值 试的品 的 抑菌 活 性 。
80或 其 他 无 抑 菌性 无 的 表 面 菌活 性剂 充 混分匀 。表 面 活 性0
℃( 特 殊情 况 ,下最多 不 超 4过℃5〉 剂的温 度 — 不 般 过 超荃,
小
混 合 心若 , 需 可 在要水 浴 进 中行 然, 后加 人预 热 的稀 释 液 使
成05,可 采%用 下 方述 消法除 供
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魔1
:10供 试 液, 温保, 混 ,并合 在 最 短时 间 形内成 乳 状
液
。 要必 时 ,用 稀 释液 或 含 上 述表面 活 性 的稀剂释 液进 一
(步D增加 稀 释 液 或 养 培 体 基积。
( 2加 )人 适宜 的 中 和 或 剂 灭剂活 ◇ 中和 剂 或 活灭 剂 (表 )2可 用 于 消 除干 物扰的 菌抑活
,
性01 系倍 稀列 释
。(4)需 用 特殊 法方制 备 供 试 液 供 试 的品膜 剂试供品 蛋白 缓 冲胨 ,或液 供取 试 ,品 剪 碎加
,哆
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p7H0. 无菌 化氯钠
-最好 在 稀 释 液 或培养 基 菌 灭前 人加 。若 用 中 使 剂和 或灭 活剂,试 验 中应 设中 剂和或 灭 活 剂对 照 组 即, 取相 量应稀 释 液 替 代 供试 品同试验 组 操 作 以 确 ,认 有 其效 和性对微 生物 无 性 毒。和中 剂 或灭 活 剂 对照 组 的菌落 数 与菌 对液照组 的菌 落 数 的 比 应值在
pH.7磷 2酸 缓盐 冲液 或,胰 大酪 豆 胨 液
体
培养 基浸,泡 , 振摇, 成制节 供 试液
1
1:0的供 试 。液若 需 要,调
pH值 至
68~
。必
要 时 用 ,同 一 稀 释液 将 试供液
进 一 步1倍0 系 列稀 释 。肠溶 结肠 及 溶制 剂供 试 品 取 供 试 品 , 人
0加.~5范 2 围 。
内pH6
8.
菌无 酸 盐磷缓 冲 液(用 于 溶肠 制剂) 或
p
H,7无
6
表
2见常干 扰 的 物和 中剂或 活 灭方
可选 法 的用中 剂和 灭 或 方 法活
磷菌酸 盐 缓冲
扰 干
物—・
液
用 ( 于 肠 溶 制 结 ),剂置 54℃ 水 中浴, 振 ,摇使 解 ,制 溶
成1:
10 的 试供 。必 液要 时 用 ,一 同稀释 液 将 试供 液进 一
步 气 雾剂
、喷 剂雾供 试品 取 供 试品, 置一 ⒛℃ 或 他 其
醛适
类
汞剂 酚制类、 醇乙、 类醛 吸、物
附亚硫酸氢
钠 释稀法甘氨 卵酸磷脂
1
0倍系列 稀 释
。 宜 温 度 冷冻 约1小 时取,出 ,迅 速 消毒 供 品试 开启 部 位用, 无菌 钢 锥 在该部 位 一 小 孔 ,钻放至 温室, 轻 并 转轻 动 器容
,
铵季 化合 物 、对羟 基苯 甲酸、双 胍类合化 季铵物化物 、合碘、对羟 基 苯酸甲水银 水银 、化物 汞醛类
使 抛、 射 缓 剂缓全 部 释 出 。 试 供品亦 可 用采 其 适 他宜 的 方 取 法出 。用 无 菌注 射 器 每从 一 容 器中 吸 出药 液于 无 菌容 器中 合混 然 后, 样 检 查取 贴。裔供试剂 品 取供 试 ,品 去掉 防 粘 ,将层粘 贴 面 朝 上
聚梨酯 巯山基酸醋 盐代硫酸盐 硫镁钙或子 离氨对基苯 酸甲卩内酰 胺
酶
DTEA、 喹酮类喏生素抗
磺胺 类内产酰类抗胺生
放素置 在 菌 玻 璃无 塑 料或 器皿 上 在 , 粘 面 上贴覆 一 盖 层 宜 的 适无 菌多 孔 料 材如 ( 菌无纱 布 ),避 免 贴 膏剂 粘 贴在 起 一。 处将 理 的后贴膏 剂 放 入 盛 有 适 宜体 积 并 有含 表面 性 活 (如 剂聚 梨山酯 8或0卵 磷 脂稀 释 液 )容 的 器中,振 至荡少 3分0 钟。 必 要 ,用时同 一稀 释液 将 试供 进 液一 步1 0 倍列系稀 释
。3)采(用 薄 膜 过 滤 法 (4。上) 几 种 述方 的联法合 使用 。 若 没有适 宜 消 除供 试 抑品 菌活 性 方的法 , 对 定 试 验 特菌 收 的失 回败 表 ,供 明 品试 对该试 验 菌 具 有 较 强抗菌 活 性, 同 也 表 明供 试 时品不易 被该 类 微生 物污 染 但。是 , 试 供品 也可能 对 仅 定特 验试 株菌 具 有抑制 作用 而 对 ,其他 菌 没 有 抑株制 作 。因用此, 根据 供 试 品须符 合的微 生 物限度 标 准和 菌 数报 告规 则, 在不影 检 响 验结果 判 的前 提断下 ,应 采 用 使 微能生
.接2 和 种稀 释
按下 列 求 进 行 供要 试液 接 的种 稀 和 释, 制备 生微物 回 试 收 验 供 用试 液。所 菌 液 加的体 积 应不 超 过 供 试 体液 积 1的% 为 确。认 试供 品中 的 微 物生能 被 充 检分 出,首 先应 选择 低最 释稀 级供 的试 进 行液计 数方 适 用 法性试 验 。 (1)试验 组 取 上 述制 备 好 的供 试 液加 人,试 验 菌 液
,物
生 的更 长高 稀 级 的释供试 进液行 计数 方 法 适 用 性 试 验 若。方 法 适用 性试 验 符合 要 求,应 以 稀 释该 供 试 级 作 液最为 稀 低 释 级供 试的 液进 行 供 试 检 查 。
品混匀 , 使 1ml供每 液 或 试每 张 膜滤所 滤 的供过试 液 中含 量 菌不 于大 01cfu。 (0)2
供试 对 照 组品 菌 液试 同验组 作操 。
3)( 液菌对 照
组取
各制好 的 供 试液 ,以稀 释 液 代
替.4 供试 品 微中 物 生 的回收表
所1列 的 计 数 方 适 用 性法试 验 用的各 试验菌 应 逐 一 进 行微 物生 回试收 验 微 生。物 的收回可 采用 平 法皿 、膜薄过 滤 法
或
取 不含中 剂 和 及灭 活 的剂 应相稀 释 液
代供试替液 , 按验组试操加人作试菌验液并行进微生物 收试回 。 若 验因 供 试抗 菌 活品 性或 溶 解 性较差 的 原因导 致 无 法 选 择 最低 稀 释 级的 试 液 进供行 方 法 适 用 性试 验 时, 采应 用适 宜 的 方法 对供 液试 进 行 进一步 的处 理 。如 果 供试 对 品 微 物生生 长 的抑 制作 用无 以法其他 方 法 消除 , 试 供 液可经 过 中 、和 稀
释
MP法N
(。)平1皿 平法 皿 法包括 倾 注 和涂法 布 法。表 1中 每株 试
,验 菌每
种 养培基 至少制备2 个 皿 平以 算,术均值作为计 结果数 ”“ ” “倾 注法 取照上述 供 液试的 制备接 种 稀 和 释和“ ” 菌抗活 性去 除的或 灭 活制 备的供 试 液1 lm置 ,苴 90径m
m
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