葡萄酒中乙醇含量的气相色谱法测定
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2010No.9
Serial No.222
China Brewing
Analysis and
Examination
葡萄酒中乙醇含量的气相色谱法测定
陈
霞
(泰州市疾病预防控制中心,江苏泰州225300)
摘要:为建立气相色谱法直接测定葡萄酒中的乙醇含量的方法,将样品稀释后直接进样,经过DB -FFAP 毛细管色谱柱分离后用气
相色谱FID 检测器进行分析。在所建立的最佳实验条件下,葡萄酒中乙醇峰得到有效分离,线性良好,最低检出限为0.01%,相对标准偏差为3.6%~4.0%,平均回收率为90%~95%。说明该方法灵敏、简单易操作、准确可靠,用此法检测葡萄酒中的乙醇含量,结果满意。关键词:葡萄酒;乙醇;气相色谱法中图分类号:O657.7
文献标识码:A
文章编号:0254-5071(2010)09-0152-01
Determination of ethanol in wine by gas chromatography
CHEN Xia
(TaizhouCenters for Disease Control and Prevention, Taizhou 225300, China)
Abstract:To establish a method to determine ethanol content in wine by gas chromatography, the samples were diluted and were directly injected into gas chromatography, and separated by DB -FFAP capillary column and then detected by FID detector. Under these optimal experimental conditions, the methods had a wide linear range. The determination limits, the relative standard deviation and the rate of recovery are 0.01%,3.6%~4.0%and 90%~95%,respectively. This method is sensitive, simple, and accurate. It could be applied to determine the ethanol content in wine. Key words:wine; ethanol; gas chromatography
葡萄酒中的乙醇含量是衡量酒质量的重要指标之一,快速、准确测定酒中乙醇含量对于确保酒的质量和保护消费者的健康具有重大意义。目前,密度瓶法是一种较为经典的检测方法,酒精计法是基于阿基米德定律制成的一种测定酒精水溶液中乙醇的体积百分含量的专用仪器,2种方法[1-2]需将样品溶液蒸馏后再测定,较为繁琐。本实验采用气相色谱[3-4]直接进样法测定,经多次实验证明,适用于各种酒中乙醇含量的测定,方法精密度、准确度均较理想。1材料与方法1.1仪器
Agilent 7890A 气相色谱仪,附氢火焰离子化检测器(FID ),化学工作站;电子天平(精确到0.0001g );DB -FFAP 色谱柱(30m ×0.25μm ×0.25mm )。
试剂:乙醇、甲醇(色谱醇):均购自国家标物研究中心。1.2色谱分析条件
色谱柱:DB-FFAP 色谱柱(30m ×0.25μm ×0.25mm ),程序升温60℃(保持2min ),以5℃/min升至110℃(保持5min ),检测器(FID )温度220℃,分流比5∶1,进样口温度200℃,
氢气流速40mL/min,空气流速400mL/min,载气(N 2)30mL/min,进样1.0μL 。1.3标准曲线的制备
取100mL 容量瓶5个,分别加入适量的甲醇,各取2.0mL 、2.5mL 、3.0mL 、3.5mL 、4.0mL 乙醇(色谱纯),用甲醇稀释至刻度,配制成2.0%vol、2.5%vol、3.0%vol、3.5%vol、4.0%vol
收稿日期:2010-04-16作者简介:陈
的乙醇标准系列。2结果与讨论2.1色谱柱的选择
分别选用DB -FFAP 色谱柱和HP-5色谱柱进行测定,结果表明DB-FFAP 色谱柱分离效果最佳,甲醇和乙醇得到较好的分离,色谱图见附图。
2.2样品前处理
用甲醇稀直接取葡萄酒样品25mL 于100mL 容量瓶中,
释至刻度。实验分别用水和甲醇作为稀释液,结果表明,用甲醇作稀释液,峰分离良好,避免了因用水作稀释液污染色谱柱而缩短柱使用寿命。
2.3方法的标准曲线、线性关系及检出限。
将浓度对应相应的色谱峰峰面积进行回归处理,得线性回归方程,见表1。
霞(1975-),女,主管技师,主要从事理化检验工作。
分析与检测
中国酿造
2010年第9期总第222期··153
枯草芽孢杆菌E 20发酵产生挥发性风味成分的GC/MS分析
郭成栓1,欧阳蒲月1,谢
和2
(1. 广东食品药品职业学院中药和生物系,广东广州510520;2. 贵州大学生命科学学院,贵州贵阳550025)
摘要:以枯草芽孢杆菌E20作为菌种,大豆作为培养基,在高温条件下固体发酵,用乙醚提取其挥发性成分,经GC/MS技术测定,鉴
定出的主要物质有苯基乙醛、4-甲基-2,6-二叔丁基-苯酚、吲哚、α-呋喃甲醇、2,3,5-三甲基吡嗪、2-乙酰基噻唑、苯甲醇、苯乙醇等酱香型白酒的风味骨架成分,说明枯草芽孢杆菌在白酒酱香风味物质的形成中发挥着重要的作用。关键词:酱香;枯草芽孢杆菌;GC/MS中图分类号:O657.7
文献标识码:A
文章编号:0254-5071(2010)09-0153-02
Analysis of volatile compounds produced by Bacillus subtilis E 20with GC/MStechnique
GUO Chengshuan 1,OUYANG Puyue 1, XIE He 2
(1.Department of Chinese Medicine and Biology ,GuangDong Food and Drug Vocational College ,Guangzhou 510520, China;
2. College of Life Science, Guizhou University, Guiyang 550025, China)
Abstract:Soybeans were fermented by Bacillus subtilis E 20. The volatile components in product were extracted and identified by GC/MS.The main chemical components were phenyl acetaldehyde, 4-methyl-2,6-di-tert-butyl-phenol, indole, α-furan methanol, 2,3,5-trimethyl pyrazine, 2-acetyl thia-zole, benzene, methanol, benzene ethanol, et al. These results indicated that Bacillus subtilis plays an important role in producing aroma compound in soy sauce production.
Key words:soy sauce; Bacillus subtilis ; GC/MS
酱香突出是酱香型白酒最重要的特色,酱香风味物质一般认为是通过美拉德反应生成的[1],微生物对于美拉德反应的进行及酱香风味物质的生成起着重要的作用[2],而在发酵区系的众多微生物中,一般认为芽孢杆菌发挥着最重要的作用[1-8]。本研究利用从茅台酒高温大曲中分离到一株兼性嗜热枯草芽孢杆菌,利用该菌株在高温条件下进行发酵,其发酵产物具有浓郁怡人的酱香气味,用乙醚对发酵产物进行萃取并利用GC/MS技术分析了该菌株高温条件下发酵产生的挥发性香味成分的种类及含量,以阐明枯草芽孢杆菌在酱香型白酒酱香风味物质形成中的作用。
收稿日期:2010-04-28
1材料与方法1.1材料1.1.1菌株
分离自贵州茅台酒高兼性嗜热枯草芽孢杆菌E 20,温大曲。1.1.2培养基
(1)斜面培养基:牛肉膏0.4g ,蛋白胨1.0g ,NaCl 0.4g ,pH 值7.0~7.2,121℃、0.1MPa 灭菌30min 。
(2)种子培养基:葡萄糖10g ,蛋白胨5g ,酵母膏5g ,Na 2HPO 40.4g ,KH 2PO 40.03g ,CaCl 20.02g ,MgSO 4·7H 2O
作者简介:郭成栓(1977-),男,河南南阳人,博士研究生,主要从事发酵工程及生物工程的相关研究工作。
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表1
标准曲线回归方程、相关系数及检出限
2.5葡萄酒样品分析
实验对3种葡萄酒进行分析,瓶身标示皆为12%vol,实际检测结果分别为11.6%vol、11.7%vol、11.6%vol。3小结
应用本方法测定葡萄酒中的乙醇浓度,其样液可直接进样,线性范围宽,准确度及精密度令人满意,完全可适应葡萄酒中乙醇含量的测定要求。参考文献:
[1]GB/T15038-20061. 葡萄酒、果酒通用分析方法[S].[2]GB/T500948-2003. 食品卫生检验方法(理化部分)[S].
回收率/%90.00
92.0095.00
[3]谢
文,丁慧瑛,章晓氡. 葡萄酒、果酒中乙醇含量的测定方法[J].色谱,2004,22(5):561.
[4]靳春林,张宏志. 毛细管柱气相色谱法快速测定中药酒中的乙醇量[J].山东化工,1998(5):41-43.
Table 1. Regression equation of standard curve, correlation coefficient
and detection limit
组分乙醇
浓度/%2~4.5
回归方程式y=3.614×102x-1.241
线性系数0.9999
检出限/%0.01
2.4精密度与回收率实验
对同一样品重复进行6次测定,并对该样品进行加标实验,其回收率和相对标准偏差见表2。
表2
组分样品本底值/%乙醇
2.90
方法准确度(n=6)和精密度加标量/%
0.50
1.001.50
测定值/%3.353.824.33
RSD/%3.403.604.00
Table 2. Method accuracy (n=6)and precision