纳米药物载体在医药领域中的研究进展
第29卷第2期Vol 129, No 12
济 宁 医 学 院 学 报
JOURNAL OF JINING MEDICAL COLLEGE
2006年6月Jun, 2006
纳米药物载体在医药领域中的研究进展
钱 倩 综述 王伯瑶 审校
(四川大学基础医学与法医学院基础医学系)
纳米本身是个长度单位, 1nm 等于10-9m, 纳米颗粒的粒径比毛细血管通路还要小12个数量级。当一种物质被不断切割至一定程度, 其粒子小至纳米量级即为纳米材料。纳米材料往往会产生一些新的理化特性, 正是这些特有的特性, 使其在药物和基因输送方面有许多优越性:¹许多半衰期短的药物可能需要每天重复给药多次, 制备成缓释药物后, 将极大延长药物作用时间º能解决口服易水解药物的给药途径问题, 大大降低药物与胃蛋白酶等消化酶接触的机会»可进行靶向给药:纳米载体经特殊加工后可达到靶向输送的目的, 更加准确地对准组织或器官, 减少药物对人体的不良反应¼载药纳米粒可以改变膜转运机制, 增加药物对生物膜的透过性, 有利于药物透皮吸收与细胞内药物发挥½可在保证药物作用的前提下, 减少给药剂量, 减少药物的副作用¾可消除特殊生物屏障对药物作用的阻碍¿能携带多种化学药物À载体及其生物学降解产物易被消除。
纳米药物载体在医药领域的应用极为广泛, 提高药物的利用率疗效和减少药物的副作用已成为医药研究领域的一项重要课题。一种理想的纳米药物载体应具备以下特征:¹
参考文献
11程雪梅, 边旭明, 郎景和, 等. 妊娠期宫颈涂片细胞学检查. 中国医学科学院学报, 2000, 22(2) :174
21Palle C, B angsboll S, Andreas son B. Cervical intraepithelial neoplasia i n pregnan cy. Acta Obstet Gynecol Scand, 2000, 79(4) :306
31Bristow RE, F. J. Montz 1Cervical cancer i n pregnancy. Lippi ncott Willi ams and Wi lkins, 19991157~175
41Nobbenhuis MAE, Helmerhorst TJM, van -den -B rule AJC, et al. High -risk human papill omavirus clearance in pregnant women :trends for lower clearance during pregnancy with a catch -up post 2partum. . B r J Cancer, 2002, 87(1) :75
51Arena S, Marconi M, Ubertosi M, et al. H PV and pregnancy:diagnos 2tic methods, transmission and evoluti on. Minerva Ginecol, 2002, 54(3) :225
61Si lverberg MJ, Thorsen MP, Lindeberg H, et al. Condyloma i n preg 2nancy is strongly predictive of juvenile onset recurrent respiratory pa 2pillomatosis. Obstet Gyn ecol, 2003, 101(4) :645
71邓东锐, 闻良珍, 凌霞珍. 亚临床型人乳头瘤病毒感染垂直传播途径的研究. 中国实用妇科与产科杂志, 2005, 21(1):45
81Mikhail MS; Anyaegbunam A; Romney SL. Computeried colposcopy and conservative managem ent of cervical intraepi theli al n eoplasia i n pregnan cy. Obstet Gynecol Survey, 1996, 51(3) :169
91Baldauf JJ; Dreyfus M; Ritter J. et al. Benefits and ri sks of directed biopsy in pregnancy. Obstet Gynecol Survey, 1998, 53(2) :81101郎景和. 子宫颈上皮内瘤变的诊断与治疗. 中华妇产科杂志,
2001, 36(5) :261
111Richard RM, Barron B A. A follow-up study of patients with cervi 2
cal dysplasia. Am J Obstet Gynecol, 1969, 105:386
具有较高的载药量, >30%º具有较高的包封率, >80%»
制备和纯化方法简便, 容易放大至工业化生产¼载体材料可生物降解, 毒性较低或没有毒性½具有适当的粒径与粒型¾具有较长的体内循环时间。1 纳米药物的种类111 纳米粒
纳米囊和纳米球统称为纳米粒(nanopar ticles) , 是直径为10-1000nm 的一类聚合物胶体系统, 纳米球有高分子基质骨架, 药物分散其中。纳米囊由高分子材料形成的外壳和液状(水或油状) 内核构成, 药物通常被聚合物膜包封在内核层[1]。理想的纳米粒载体是无毒和可生物降解的, 纳米粒的特异靶向性使药物和靶基因被定向释放出来, 载体则被生物降解, 避免在转运过程中在其他组织释放, 产生副作用或过早被灭活。用于纳米粒载体研究的生物可降解聚合物主要有合成聚合物如:聚乳酸(PLA) 、聚乙醇酸(PGA) 、聚己内酯(PCL) 、聚乳酸共聚乙醇酸(PL-GA) 以及天然高分子材料, 如普鲁兰、壳聚糖、明胶、海藻酸钠以及其他亲水性生物可降
[2]
解聚合物。
121David A, Van Nos trand KM , Nguyen NJ, et al. T he effect of rout of
deli very on regression of abnormal cervical cytology fi n dings in the postpartum period. Am J Obstet Gynecol, 1998, 178(6):1116131Paraskevaidis E; Koliopoulos G; Kalantaridou S; et al. Management
and evoluti on of cervical intraepitheli al neoplasia during pregnancy and pos tpartum. Eur J Obstet Gynecol Reprod Bi ol, 2002, 104(1) :67
141Howard MJIII. Pos tpartum evoluation of cervical squamous i ntraep 2
ithelial lesions wi th respect to the route of delivery. Obs tet Gyn ecol Survey, 2003, 58(2) :109
151Vlahos G; Rodolakis A; Di akomanolis E; et al. Conservative manage 2
ment of cervical intraepith elial neoplasia(CIN (2-3) ) i n pregnant women. Gynecol Obstet Invest, 2002, 54(2) :78
161Murta EFC; de-Souza FH C; de-Souza MAH, et al. High-grade
cervi cal squamous intraepithelial lesion during pregnancy. Tumori, 2002, 88(3) :246
171Gentry DJ, B uggish MS, Brady K, et al. The effect of loop ex i sion of
the transformation zone on cervical length:i m plication for pregnan 2cy. Am J Obstet Gynecol, 2000, 182(3) :516
181Robinson WR, Webb S, Tirpack J. et al. Managem ent of cervical i n 2
traepithelial neoplasia duri ng pregnancy wi th loop exision. Gyn ecol Oncol, 1997, 64:153
191M i tsuhashi A, Sekiya S. Loop electrosurgical excision procedure
(LEEP) during first trimester of pregnancy. Int J Gynecol Obstet, 2000, 71:237
201Dunn TS, Ginsburg V, Wolf D. Loop-cone cerclage in pregnancy:a
5-year review. Gynecol Oncol, 2003, 90:577
(收稿日期 2006-04-20)
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制备纳米粒的方法主要有乳化聚合法、天然高分子聚合法、液中干燥法、自动乳化/溶剂扩散法、超临界流体法、溶剂蒸发法等。分子自组装法由于在制备过程中不需要添加乳化剂、表面活性剂等有机溶剂, 可减少载体的毒性; 另外该方法工艺简单、成本低, 具有很好的产品开发前景。由于制备过程的不同, 纳米粒可用于包裹亲水性药物或疏水性药物。适用于不同的给药途径, 如静脉注射的靶向作用, 肌肉皮下注射的缓释作用。口服给药的纳米囊和纳米球也可用于非降解性材料制备, 如乙基纤维素, 丙烯酸树脂等。1. 2 纳米脂质体
纳米脂质体(nano-liposomes) 作为一种新型定向药物控释载体越来越受到重视。脂质体是由磷脂依靠疏水缔合作用在水中自发形成的一种分子有序组合体, 为多层囊泡结构, 每层均为类脂双分子膜, 层间和脂质体内核为水相, 双分子膜间为油相。按照脂质体的结构和粒径可以分为单室脂质体(UV) . 多室脂质体(MLV) 和含表面活性剂的脂质体, 目前的脂质体以单室脂质体居多。
靶向性是脂质体作为药物载体的主要目标之一。脂质体是治疗肝寄生虫病、利什曼病等网状内皮系统疾病理想的药物载体。另外, 因为脂质体的主要辅料为磷脂, 而磷脂在血液中消除极为缓慢, 药物包埋在脂质体中缓慢释放, 延长了药物的作用时间, 起到长效作用, 使病灶部位充分得到治疗[3]。同时, 可将单克隆抗体连接到脂质体中, 借助于抗原与抗体的特异反应, 将载药脂质体定向输入, 使靶器官或组织的药物浓度提高, 而另外的器官和组织的药物浓度降低, 降低药物对这些器官或组织的副作用。近年来, 脂质体用作基因转移的有效载体[4, 5]较病毒类载体有更大的优势, 受到广泛的关注。
脂质体可以通过薄膜的水合作用, 反相蒸发法、冷冻干
[6]
燥法、溶剂注入法等方法制备。由于脂质体存在靶向性低, 贮存中稳定性不佳, 包封率低等缺点。为克服这些缺点, 科研人员已研发的产品有隐性脂质体, 免疫脂质体, PH 或温度敏感脂质体, 阳性脂质体, 柔性脂质体等各种功能型的脂质体。Nill 等[7]合成的高分子表面活性剂聚环氧乙烷-聚环氧丙烷-聚环氧乙烷(P EO-P PO-PEO) 聚合脂质体, 不仅稳定性强而且具有对温度敏感的特性。1. 3 固体脂质纳米粒
实心脂质纳米粒(solid lipid nanoparticles, SLN) 粒径为50~1000nm, 是近年来颇受重视的一类纳米粒子给药系统。与以磷脂为主要成分的脂质体双分子层结构不同, 固体脂质纳米粒是以多种固态的、天然或合成的类脂材料如/脂肪醇、脂肪酸、磷脂、三酰甘油0等形成的固体颗粒。M ller 称其为/次生代脂质体给药系统0(the next gener at ion of delivery sys 2tem after the liposomes) , 亦称lipopearls 。
SLN 具有一定的缓释作用, 主要指用于难溶性药物的包裹, 如阿霉素和环孢霉素等。它可用作静脉注射或局部用药, 也可作为靶向定位和控释作用的载体, 能避免药物的降解和泄漏。与脂质体相比, SLN 具有毒性低, 载药量高, 生物稳定性好等特点。SLN 既可以装载亲水性药物, 又能用于装载疏水性药物。适合于大规模生产。SLN 的制备主要有超声分散法、高压均化法、溶剂乳化法/挥发法及微乳法等。侯冬枝等[8]采用改良的高剪切乳化超声法(modified high shear homogenization and ultr asound) 制备SLN, 平均半径为106nm, 稳定性较好, 可制成冷冻干燥剂, 用以包封临床用于流产的米非司酮, 包封率为87. 89%。
1. 4 聚合物胶束
纳米胶束(nano-micelles, NM) 是近几年来正在发展的一种新型的纳米载体。因其具有亲水性外壳及疏水性内核, 适合于携带不同性质的药物, 而且可使药物逃避单核巨噬细胞的吞噬, 使其具有隐形性[9]。
通常合成纳米胶束的亲水链段用聚乙二醇(PEG) 、聚氧乙稀(PEO) 、聚氧丙烯等, 而疏水链段用聚乳酸、聚丙交脂-乙胶脂、壳聚糖等, 目前研究较多的是PLA 与PEG 的嵌段共聚物(PLA -PEG) 以及PEG 与其他共聚物的嵌段共聚物[10, 13]。
2 纳米药物载体的研究
目前国内以及国外对纳米药物载体的研究较多, 具有代表性的纳米载体有如下几个:2. 1 纳米磁性颗粒
纳米磁性颗粒是当前纳米研究的热点, 磁性药物颗粒是由药物磁铁粒子载体及骨架材料组成。该药物在外磁场作用下, 通过纳米微粒的磁性导航, 使药物移向病变部位, 达到定向治疗目的。磁性纳米颗粒, 尤其是顺磁性或超顺磁性的铁氧体纳米颗粒在外加磁场的作用下, 温度升高至40e ~45e 时, 可达到杀死肿瘤的目的。
张阳德等人开展了高性能磁性纳粒DNA 阿霉素治疗肝癌的研究, 研究结果表明磁性阿霉素白蛋白纳米粒具有高效磁靶向性, 在大鼠移植肝肿瘤中的聚集明显增加, 而且对移植性肝肿瘤有很好的疗效[14]。
2. 2 纳米智能药物载体
纳米智能药物载体的制备是纳米生物技术的一个分支, 智能纳米药物就是在靶向给药的基础上, 设计合成缓释药包膜, 采用纳米技术制备纳米药物粒子, 结合靶向给药和智能释药优点, 用纳米技术完成制备智能纳米缓释药的目的。即除能定点给药之外, 还能根据用药环境的变化, 自我调整对环境自动给药[15]。此种药物载体生物利用度高, 毒副作用小, 药物释放半衰期适当。
智能纳米药物载体包括纳米磁性粒子, 纳米高分子和纳米脂质体。制备纳米智能药物就是通过对纳米药物载体的结构设计、合成, 制备出具有智能释药能力的纳米药物载体。2. 3 树枝形聚合物
近年来出现了一种新型的三维、高度支化的纳米材料-树枝状高聚物(dendrimers) , 这种纳米材料为放射状对称的球形多聚物, 表现出了树枝状的几何外观。因为其形状及表面胺基因的设置精细, 故又有/人工球状蛋白0之称。他的分子表面有极高的官能团密度, 分子有球状外形, 分子内部有广阔的空腔, 这些不同寻常的性质使其在生物医学领域, 从简单的药物运送载体, 到复杂的医疗成像等许多方面, 诸如纳米级生物传感器, 纳米级药物及基因载体, 以及免疫诊断纳米级试剂等都得到了应用。
Dendr imers 合成方法有收敛法和发散法两种[16]:收敛法是由一系列小分支的反复偶合, 生成树枝状结构, 然后锚定一个核心分子, 从而产生一个由多个树枝状结构组成的den 2drimers 。发散法以一个核心起始分子(如氨, 乙二胺, 丙胺等) 经逐级聚合反应向四周放射状生长、加层, 最终形成树枝状结构。D endrimers 核心分子的选择十分重要, 它决定了整个dendrimers 及共表面电荷的密度。现阶段, dendr imers 中研究最热的为聚酰胺-胺型树枝状高聚物(polyamidoamine dendrimers, PAMAM-D) 。PAMAM-D 表面有大量的分子基团, 可以像钩子一样携带一些有用的分子, 在它的内部也
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可以携带其他分子, 这些特性使其成为一个很好的载体。尤其是作为基因转移载体, 它表面的带正电性的胺基很容易与DNA 中的带负电的磷酸基连接, 形成DNA-树枝大分子复合物, 并且具有螺旋管状结构。B. J. Roessler 等人[17]的研究显示附加物B -环糊精被连接到DNA-树形大分子体系上, 促使该体系形成了更小、更多的单分散颗粒。
与传统的药物载体相比, 树状分子具有无免疫原性、无细胞毒性、稳定性很高的基因转移效率等特点, 大大促进了Dendrimers 材料在基因治疗领域与新型药物载体开发方面的应用。
3 纳米药物载体在临床医学中的应用3. 1 抗肿瘤药物的载体
癌症已经成为危害全世界人类健康的一大疾病。近年来, 纳米胶囊或微粒作为抗肿瘤药物载体的研究已经成为医学工作者关注的焦点。现有的抗肿瘤药物大多特异性差。癌症药物治疗的一个关键就是如何把药物定向的输送到癌症细胞而又不损伤正常细胞。脂质体或微胶囊作为药物载体可增加药物的水溶性, 使药物获得靶向性, 缓释抗肿瘤药物, 延长药物在肿瘤内的存留时间, 减少给药次数和毒性反应, 延长了患肿瘤动物的存活时间。Soma [18]研究了巨噬细胞对含阿霉素的纳米粒子的影响, 结果表示, 使用含阿霉素的纳米粒子对癌细胞的毒性远远高于游离阿霉素时的毒性作用。
3. 2 口服药物载体
将一些口服药物用纳米粒子包裹后可降低胃酸、胃蛋白酶对药物的分解作用。而且, 纳米粒子能够促进那些被包裹的口服吸收特异性很差的药物在肠道的传递, 延长药物的作用时间, 环孢素是临床上常用的一种抗器官移植排斥反应的药物, 水溶性差, 体内吸收缓慢不规则, 口服其油性口服液及油溶液胶囊的生物利用度约为30%。瑞士Sandoz 公司通过微乳化制备的环孢素微乳软胶囊, 将其生物利用度提高1倍。
3. 3 血管再狭窄的防治
再狭窄是冠状动脉经皮腔内成形术(PTCA) 后出现的一个常见、严重的并发症, 中层平滑肌细胞过度增生、迁移形成的新生内膜增殖性阻塞, 是影响手术成功率及病人预后的主要并发症。密执安大学儿科心血管系的Levy 研究小组长期致力于纳米控释系统的研究, 并创造性地提出把纳米控释系统与导管介入技术相结合, 心血管内局部用药, 防止成形术后的再狭窄。他们在狗的颈/股动脉离体模型中证明了该设想的可行性[19]。利用可降解材料制成的纳米粒子进入动脉壁后逐渐水解, 缓慢持续的释放内含药物。从而运用介入导管可将纳米粒子置于血管成形术部位, 以期达到防治再狭窄的效果。所以血管内部应用纳米控释系统防止血管再狭窄具有光明的前景。3. 4 基因药物载体
反义寡核苷酸技术是基因治疗的常用方法之一, 它的基础是根据核酸杂交原理设计针对特定靶序列的反义核酸, 从而抑制特定基因的表达。反义寡核苷酸药物可与特定的靶基因杂交, 在基因水平上干扰致病蛋白质的产生过程。由于体内无处不在的核酸内切酶和外切酶的降解作用, 寡核苷酸利用度大大减少。纳米载体与DNA 结合后, 可以避免DNA 的过多降解, 并提高其被细胞捕获的能力。3. 5 靶向脑部给药的载体
由于存在血脑屏障, 通常的药物不易进入脑部, 使得该
部位的疾病诊断和治疗非常困难。研究表明, 纳米粒子经过适当的修饰, 可通过血脑屏障, 把药物定向的输送到中枢神经系统而发挥作用。Alyautdin 等证明, 用吐温80(polysor 2bate 80) 包裹聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒子, 能输送阿片受体激动剂loperamide 通过血脑屏障, 从而发挥镇痛作用。4 展望
纳米生物技术是一门新的交叉学科, 为研究、改造生物分子结构和进行医学治疗提供了新的手段和思维方式, 而纳米药物载体技术在医药领域的发展前景更为广阔, 相信纳米药物载体将在人类重大疾病的诊断、治疗、预防等方面发挥重大的作用。
参考文献
[1]B rigger I, Dubernet C, Couveur P. Nanoparticles in cancer therapy
and diagnosis. Adv Drug Deli v Riv, 2002, 54(5):631[2]胡兴, 邹国林. 物可降解聚合物纳米粒给药载体. 氨基酸和生物资源, 2003, 25(2) :52
[3]Salafasky B , He YX, Li J, et al. Study on the effi cacy of a new long-acting formulation of N, N-diethyl-m-toluamide(DEET) for the prevention of thic attachment. American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, 2000, 62(2) :169
[4]Si ngh M, Srivastava I. Advances in vaccine adj uvants for infectious
diseases. Curr HIV Res, 2003, 1(3) :309
[5]CaraccioloG, Pozzi D, Camm i ti R, et al. Structual characterization of a new lipid/DNAcomplex showi ng a s elective thansfection efficiency in ovari an cancer cells. Eur Phys J E Soft M atter, 2003, 10(4) :331[6]SharmaA, Straubinger R M. Pharm Res, 1994, 11(6) :889
[7]Ni ll B , Katarina E. Journal of Colloid and interface Science, 2004, 276(2) :400
[8]HouDZ, Xie CS, H uang KJ , et al. The producti on and charateristi cs of solid lipidnanoparticles(SLNs).Biomaterials , 2003, 24(10) :1781[9]Wang Z Y, Zhang D S. J Southeast U niv(M ed Sci Edi) , 2004, 23(2) :131
[10]Yasugi K, Nagasaki Y, Kato M, et al. J C ontrolled Release, 1999,
162(1-2) :89
[11]Kataoka K, Matsumoto T, Yokoyama M, et al. J Controled Release,
2000, 64(1-3) :143
[12]SeongL E, Kun N, Han B Y. Journal of Controled Release, 2003, 91
(1-2) :103
[13]Lin W J, Juang L W, Li n C C. Pharm Res, 2003, 20(4):668[14]张阳德. 载阿霉素磁性白蛋白纳米粒) ) ) 一种高效靶向抗肿瘤
系统. 中国现代医学杂志, 2001, 11(3) :39
[15]张亚臣, 吕宝经, 赵美华, 等. 纳米药物载体在临床医学中的应
用. 临床内科杂志, 2004, 21(7) :502
[16]Benters R, Ni emeyer CM, Wohrle D. Dendri mer -activated solid
supports for nucleic acid and protein microarrays. Chembiochem ,
2002, 2(9) :686
[17]Roessler BJ, Bielinska AU, Janczak K, et al. Substituted B -Cy 2
clodextri ns Interact with PAMAM Dendrimer -DNA Complexes and Modify T ransfecti on Efficiency. B iochem B iophys Res Com 2mun, 2001, 283(1) :124
[18]SomaCE, Dubernet C, B aratt G, et al. Ability of doxorubicin-load 2
ed nanoparticles to overcome multidrug resistance of tumor cells af 2ter thei r capture by macrophages. Pharm Research, 1999, 16(11) :1710
[19]Labhasetwar V, Song C, Humphrey W, et al. Nanoparticles for site
specific delivery of U-86983in restenosis in pi g coronary arteries. Proc Int Sym p Control Release Bioact Master, 1995, 22(7) :182
(收稿日期 2006-04-28)
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