微生物生理生化实验培养基配方
配方1(用于细菌葡萄糖发酵---半固体穿刺培养):
蛋白胨2g ,NaCl 5g ,K 2HPO 40.2g ,1%溴酚蓝3ml ,葡萄糖10g ,琼脂8g ,水1000ml 。115度灭菌20分钟。
小提示:先将蛋白胨和NaCl 溶于热水,调pH 至7.4(这时总体积接近1000ml ),再加入1%溴酚蓝3ml ,再加入糖,溶解均匀后分装。
配方2(用于细菌乳糖发酵---半固体穿刺培养):
蛋白胨2g ,NaCl 5g ,K2HPO40.2g ,1%溴酚蓝3ml ,乳糖10g ,琼脂8g ,水1000ml 。115度灭菌20分钟。
小提示:先将蛋白胨和NaCl 溶于热水,调pH 至7.4(这时总体积接近1000ml ),再加入1%溴酚蓝3ml ,再加入乳糖,溶解均匀后分装。
配方3:MR 与VP 试验-------请实验员准备
蛋白胨5g ,葡萄糖5g ,NaCl 5g ,水1000ml ,调pH 至7.2-7.4左右,115度灭菌20分钟。甲基红试剂(需新配)
40%KOH,-萘酚(需新配)
配方4:柠檬酸盐利用试验步骤(液体-直接观察现象)-------请实验员准备
NaCl 5g ,MgSO 4.7H 2O 0.2g ,磷酸氢二铵1g ,K2HPO41g ,柠檬酸钠2g ,水1000ml ,调pH 至6.8-7.0左右后加入1%溴酚蓝10ml 。
1%溴酚蓝:称取0.08g 溴酚蓝溶于0.5ml 95%乙醇中,再加水至总体积到10ml 。
以上成分加热溶解后,调pH 至6.8,然后加入指示剂,摇匀。制成后为黄绿色,分装试管,121度灭菌20分钟。
配方5:淀粉酶实验
0.2%淀粉2g ,蛋白胨1g ,1.5%琼脂20g ,调pH 7.0至7.2,水1000ml 。
小提示:可先将琼脂放入水中加热,待完全溶解后,加淀粉。混匀后高压灭菌。
检测用卢戈氏碘液
过氧化氢酶试验
过氧化氢溶液
配方6:吲哚试验-------
胰蛋白胨10g ,NaCl 5g ,水1000ml ,调pH 至7.2-7.4左右,121度灭菌20分钟。检测用乙醚及吲哚试剂
配方7:H 2S 试验:柠檬酸铁铵半固体培养基
1000ml 蛋白胨10g ,氯化钠5g ,
pH 7.2,121度灭菌20分钟。Na 2S 2O 3.5H 2O 0.5g ,柠檬酸铁铵0. 5g ,琼脂8g ,
配方8:明胶液化实验(穿刺培养)-----不做
明胶15g ,牛肉膏0. 5g ,蛋白胨1g ,氯化钠0.5g ,水100mL, 将明胶加入肉汤中,水浴加热溶解,调pH 7.2-7.4,分装试管,115度高压灭菌20min ,取出迅速冷却,使其凝固。
配方9:尿素酶试验(液体):-------
氯化钠5g ,KH2PO4
水1000mL ,pH 6.8。
尿素20g (将上述溶液灭菌后冷却至60度加入混匀即可分装)2g ,蛋白胨1g ,酚红0.012g(溶于500mL 水中,取60mL 加入即可) ,
配方10:苯丙氨酸脱氨酶试验(固体斜面):
DL-苯丙氨酸2g ,氯化钠5g ,酵母浸膏3g ,磷酸氢二钠1g ,琼脂20g ,水1000mL ,pH7.0,115度灭菌20分钟。
检测用10%FeCl3
配方11:硝酸盐还原试验(液体):----
蛋白胨5g ,硝酸钾2g (分析纯),水1000mL ,pH7.4,121度灭菌20分钟。要求容器非常洁净。
甲液:甲基
度保存。-萘胺0.6g ,5M 冰醋酸100mL ,稍加热溶解,用脱脂棉过滤,放棕色瓶中,4-10
乙液:对氨基苯磺酸0.8g ,5M 冰醋酸100mL ,先用30mL 冰醋酸溶解对氨基苯磺酸,再加冰醋酸至100mL 。放入带塞的玻璃瓶中,4-10度保存。